产品货号：
WH0122
中文名称：
病毒核酸提取试剂盒(磁珠法)
英文名称：
Magnetic Viral DNA/RNA Extraction Kit
产品规格：
50T|200T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统，从血清、血浆、淋巴液、无细胞体液、细胞培养上清液、尿液或各种病毒保存液中分离纯化高质量病毒DNA/RNA。独特包埋的磁珠，在一定条件下对核酸具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，能够达到快速分离纯化核酸的目的。整个过程安全、便捷，提取的病毒DNA/RNA得率高、纯度高、质量稳定可靠，尤其适合高通量工作站的自动化提取。使用本试剂盒纯化的核酸可适用于各种常规操作，包括RT-PCR、荧光定量PCR等各种下游实验。
保存：室温（15～25℃）干燥，可保存12个月。
(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
一、Carrier RNA溶液的配制如下：
表1：Carrier RNA工作液的配制
二、手工提取步骤：
使用前请先在裂解液RLCK中加入异丙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
使用前请先在漂洗液PWC和PWE中加入无水乙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
三、磁棒法自动化仪器提取步骤（KingFisher Flex）
使用前请先在裂解液RLCK中加入异丙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
使用前请先在漂洗液PWC和PWE中加入无水乙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
相关搜索：病毒核酸提取试剂盒(磁珠法)，磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒，Magnetic Viral DNA/RNA Extraction Kit
- 简便快捷：1小时内即可获得高质量病毒DNA或RNA。
- 高通量：可整合磁棒法自动化仪器或移液法自动化仪器进行高通量提取实验。
- 安全无毒：无需酚/氯仿等有机试剂。
| 组分 | 50T | 200T |
| 裂解液RLCK | 15mL | 60mL |
| 漂洗液PWC | 18mL | 80mL |
| 漂洗液PWE | 12mL | 50mL |
| Carrier RNA | 310μg | 2×310μg |
| 蛋白酶K | 1mL | 4×1mL |
| 磁珠悬液G | 1mL | 4×1mL |
| RNase-Free ddH2O | 1mL | 2×1mL |
| RNase-Free ddH2O | 15mL | 40mL |
保存：室温（15～25℃）干燥，可保存12个月。
(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)- 本产品适用于手工提取或自动化仪器整合。
- 自备试剂：异丙醇，无水乙醇。
- 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的核酸片段较小且提取量降低。
- 若缓冲液RLCK中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
- Carrier RNA冻干粉能够在室温储存至有效期。溶于RNase-Free ddH2O中的Carrier RNA溶液，应置于-20℃冷冻保存；而Carrier RNA溶液加入缓冲液RLCK后，在2～8℃能保存最多48小时，请现用现配。
一、Carrier RNA溶液的配制如下：
- Carrier RNA溶液：向装有310μg Carrier RNA冻干粉的管子中加入310μL RNase-Free ddH2O，将Carrier RNA彻底溶解，得到终浓度为1μg/μL的溶液，并按实验情况分装到RNase-Free的离心管中，置于-20℃储存。使用时按照提取的次数取出相应的溶液，该溶液应避免反复冻融，冻融次数不能超过3次。
注意：Carrier RNA冻干粉不能直接溶解于裂解液RLCK中，必须先溶解在RNase-Free ddH2O中，再溶解至裂解液RLCK中。 - Carrier RNA工作液：根据样品的数量计算所需裂解液RLCK和Carrier RNA溶液的体积（见表1，按每310μL RLCK加入2.8μL Carrier RNA的比例进行配制），将裂解液RLCK与Carrier RNA溶液颠倒混匀，即得到Carrier RNA工作液；为避免溶液出现起泡现象，请勿使用涡旋振荡。
表1：Carrier RNA工作液的配制
| 配制数量 | RLCK(mL) | Carrier RNA 水溶液(μL) | 配制数量 | RLCK(mL) | Carrier RNA 水溶液(μL) | |
| 1 | 0.31 | 2.8 | 13 | 4.03 | 36.4 | |
| 2 | 0.62 | 5.6 | 14 | 4.34 | 39.2 | |
| 3 | 0.93 | 8.4 | 15 | 4.65 | 42 | |
| 4 | 1.24 | 11.2 | 16 | 4.96 | 44.8 | |
| 5 | 1.55 | 14 | 17 | 5.27 | 47.6 | |
| 6 | 1.86 | 16.8 | 18 | 5.58 | 50.4 | |
| 7 | 2.17 | 19.6 | 19 | 5.89 | 53.2 | |
| 8 | 2.48 | 22.4 | 20 | 6.2 | 56 | |
| 9 | 2.79 | 25.2 | 21 | 6.51 | 58.8 | |
| 10 | 3.1 | 28 | 22 | 6.82 | 61.6 | |
| 11 | 3.41 | 30.8 | 23 | 7.13 | 64.4 | |
| 12 | 3.72 | 33.6 | 24 | 7.44 | 67.2 |
二、手工提取步骤：
使用前请先在裂解液RLCK中加入异丙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
使用前请先在漂洗液PWC和PWE中加入无水乙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
- 取200μL血浆/血清/淋巴液（样品需平衡至室温）至1.5mL离心管（自备）中。
- 向离心管中加入15μL磁珠悬液G。
注意：为了确保磁珠彻底重悬，请在使用前振荡混匀。 - 向离心管中加入20μL蛋白酶K。
- 向样本中加入300μL Carrier RNA工作液(配制方法见表1)。盖上管盖，振荡混匀10sec。
注意：当样本数目比较大时，可以按每300μL Carrier RNA工作液加入20μL蛋白酶K的比例预先混合，混合后每个样本用量为320μL，混合后的溶液室温放置不要超过1h，最好现用现配。 - 室温孵育10min，期间每3min上下颠倒混匀10sec，使磁珠和核酸充分结合。简短离心以收集附着在管壁及管盖的液体。
- 将离心管放置于磁力架上静置1min，待磁珠完全吸附时小心去除液体。
- 将离心管从磁力架上取下，加入500μL漂洗液PWC（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），振荡混匀1min。
- 将离心管放置于磁力架上静置1min，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
- 将离心管从磁力架上取下，加入500μL漂洗液PWE（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），振荡混匀1min。
- 将离心管放置于磁力架上静置1min，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
- 重复步骤9和10一次。
- 离心管于磁力架上，56℃晾干5～10min。
注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱核酸。 - 将离心管从磁力架上取下，加入100μL RNase-Free ddH2O，56℃振荡混匀5min。
- 将离心管放置于磁力架上静置2min，待磁珠完全吸附后，小心将核酸溶液转移至一个新离心管(自备)中，并于适当条件保存。
三、磁棒法自动化仪器提取步骤（KingFisher Flex）
使用前请先在裂解液RLCK中加入异丙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
使用前请先在漂洗液PWC和PWE中加入无水乙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
- 在96深孔板(自备)中加入200μL血浆/血清/淋巴液（样品需平衡至室温）。
- 每孔加入15μL磁珠悬液G（使用前用移液器吹吸或涡旋振荡混匀磁珠）。
- 每孔加入20μL蛋白酶K。
- 每孔加入300μL Carrier RNA工作液（为缓冲液RLCK（使用前请先检查是否已加入异丙醇）与Carrier RNA溶液的混合液，配制方法按表1的比例进行配制）。盖上管盖，涡旋振荡10sec。
注意：当样本数目比较大时，可以按每300μL Carrier RNA工作液加入20μL蛋白酶K的比例预先混合，混合后每个样本用量为320μL，混合后的溶液室温放置不要超过1h，最好现用现配。 - 按下表将样品和试剂转移DW Plate中，并用标鉴笔标下板的名称。
板的名称
(96孔深孔板)成分 用量 Elution RNase-Free ddH2O 100μL Wash 2_2 PWE 500μL Wash 2_1 PWE 500μL Wash 1 PWC 500μL Sample 样品 200μL Carrier RNA工作液 300μL 蛋白酶K 20μL 磁珠悬液G 15μL Tip plate Comb(磁力套) - 启动KingFisher BindIt 3.2程序，导入Pure Viral DNA_RNA Kit.bdz程序。
- 约33min后程序执行完毕。
- 取出DNA或RNA样品，用封口膜封好并保存于-80℃。
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